探討Nm23-H1與其結合蛋白調節其下游基因之表現於子宮頸癌所扮演的角色

一、背景
Human nonmetastatic clone 23 type 1 gene (nm23-H1 gene)是一metastasis-associated gene，在子宮
頸癌角色尚未清楚。我們初步發現，nm23-H1 蛋白於子宮頸侵入性癌和癌症轉移之病人，表現有
增強趨勢，但是，nm23-H1 和子宮頸癌臨床病理因子、轉移、復發和存活之關係仍需釐清。
二、目的
1. 對HeLa、SiHa 和Caski 子宮頸癌細胞，進行nm23-H1 基因重組，以癌症基因晶片檢測其
癌症或轉移相關基因(target downstream genes)。
2. 檢測nm23-H1 及其下游基因對癌細胞侵犯及轉移潛力之影響。
3. 分析nm23-H1 及其結合蛋白如h-prune、SET 和Tiam1 及其下游基因；暨nm23-H1 isoforms
和其所調節之基因如c-myc 等，於子宮頸癌組織表現情形；並和子宮頸臨床病理因子、轉
移、復發和存活作關聯性分析。
三、材料和方法
1. HeLa 癌細胞nm23-H1 蛋白表現量最高，SiHa 細胞次之，Caski 細胞很低。使用RNA
interferenc 降低HeLa 及SiHa 細胞nm23-H1 基因表現；並將nm23-H1 基因轉染給Caski 細
胞。
2. 以cancer oligo DNA microarray 檢測以上六種癌細胞，癌症基因表現之差異，找出nm23-H1 之
下游基因。
3. 以wound healing assay、soft agar colonization、modified Boyden chamber migration and invasion
assay、extracellular matrix adhesion assay 及gelatin zymography分析六種癌細胞之表現，並和
nm23-H1基因及其downstream genes作關聯性分析。
4. 蒐集子宮頸癌組織，作癌組織晶片，核質分離及免疫沉澱法及real time RT-PCR 等，測
nm23-H1 及其結合蛋白暨nm23-H1 isoforms 和其所調節之基因之mRNA 或蛋白表現，並和
子宮頸癌臨床病理特徵、復發或存活率作關聯性分析。
四、預期結果
1. 子宮頸癌細胞經nm23-H1 基因重組後，會改變侵犯或轉移潛力，且和某些癌基因有關。
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2. 某些子宮頸癌臨床病理特徵、復發或存活和nm23-H1 及其結合蛋白及下游基因或nm23-H1
isoforms 有關。