環境中氮氧化物與亞硝基化合物之毒理學研究---子計畫V：一氧化氮生物指標之建立及毒性研究

NO在以前一直被認為僅從燃燒等廢氣產生,是一種體外污染物,最近發現是一種內生性物質,具有許多生物功能,如血壓調控,神經訊息,基因表現等(1-3),長期暴露NO或生物體感染發炎等因素造成體內NO濃度的增加,使生物體產生基因毒性及許多副作用之研究也相繼被提出.最近有許多研究顯示NO與生體中蛋白之相互作用扮演著重要的生理角色(6,7),而這些與NO結合的蛋白被結合的位置大部份在Cysteine及Tyrosine residues(8,9),這些NO與蛋白之間相互作用的特性已被提出,但少有研究顯示利用此interaction作為NO外來及內生性效應之研究更少.因此本研究目的係想利用血液蛋白(包括白蛋白,血紅素)與NO暴露後之結合作用,作為一種外來性NO暴露與生物效應的指標.本研究擬完成下列工作: (1) 人體血液暴露NO後硫-亞硝基化蛋白的形成及分析;(2)硫-亞硝基化蛋白的穩定性及結合力分析;(3)亞硝基化蛋白及血色素中硫-亞硝基半胱氨酸殘基之分析;(4)鼠體暴露NO後亞硝基化蛋白及氨基酸之形成及分析;(5)NO對鼠體產生之血液毒性.從以上的研究,我們將提供(一)NO暴露量與血液蛋白之結合關係;(二)提出硫-亞硝基化蛋白或半胱氨酸殘基為外生性NO暴露的生物指標之可行性.第二,三年的工作我們將應用此指標調查分析空氣污染,醫學藥物等增加NO濃度之特定對象,做為環保醫學效應的參考及應用,詳細的方法及步驟將詳述於表C017.