Project title
93學年度國家科學及技術委員會補助研究計畫
Acronym
專題研究計畫
Internal ID
NSC93-2311-B040-005
Principal Investigator
Status
research project
Start Date
August 1, 2004
End Date
July 31, 2005
Organizations
中山醫學院生物化學研究所
Partner Organizations
Project Web Site
Options
十字花科黑腐病菌Type II傳送機器中XpsG蛋白與XpsLMN蛋白間交互關係之探討
Keywords
Type II 胞外蛋白分泌
類纖毛蛋白
類纖毛結構
Description
葛蘭氏陰性菌之胞外蛋白分泌系統至少分為五種，Type II 是其中常見的一種。該
系統之外膜分泌機器主要是以gspCDEFGHIJKLMNO 等基因產物負責，但詳細之分子
機制目前並不清楚。本計畫申請人與中興大學生化所胡念台教授、生物科技研究所呂
維茗副教授組成合作團隊對十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris)Type II 外膜分
泌系統進行研究已有多年，最近五年（1997-2002）發表的論文達四篇，另外我們三人
也已完成所有xps 基因群的knockout strain，並已製備出XpsDEFGHIJLMN 等蛋白的
抗體。在分泌機器中GHIJ 蛋白被稱為假纖毛蛋白，從正常細胞中GHIJ 蛋白所含有量
的多寡，又將G 蛋白命名為major pseudopilin，HIJ 蛋白則稱為minor pseudopilin。功
能上它們被認為會在膜上形成類纖毛結構，以進行蛋白質分泌的工作。2002 年本實驗
室於Biochem. J.發表論文指出XpsG 蛋白會形成一種類纖毛結構，橫跨內外膜，且XpsG
與XpsH 有交互作用。今年(2003)我們又進一步發現XpsGHJ 三蛋白的結合順序為
XpsG-XpsH-XpsJ，且從XpsJ 為外膜蛋白的特性，推測XpsHJminor pseudopilin 可能扮
演纖毛頂部的腳色。今年我們擬提出一個三年計劃來探討（一）XpsG 與Type II 外膜
分泌系統其他成員XpsLMN 間的交互關係，（二）在試管中重建XpsGHIJ 假纖毛重組
蛋白的交互關係，（三）以電顯與X-射線繞射分析XpsGHIJ 假纖毛重組蛋白。上述實
驗的成功對十字花科黑腐病菌Type II 外膜分泌機轉的瞭解，將有重大幫助。
系統之外膜分泌機器主要是以gspCDEFGHIJKLMNO 等基因產物負責，但詳細之分子
機制目前並不清楚。本計畫申請人與中興大學生化所胡念台教授、生物科技研究所呂
維茗副教授組成合作團隊對十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris)Type II 外膜分
泌系統進行研究已有多年，最近五年（1997-2002）發表的論文達四篇，另外我們三人
也已完成所有xps 基因群的knockout strain，並已製備出XpsDEFGHIJLMN 等蛋白的
抗體。在分泌機器中GHIJ 蛋白被稱為假纖毛蛋白，從正常細胞中GHIJ 蛋白所含有量
的多寡，又將G 蛋白命名為major pseudopilin，HIJ 蛋白則稱為minor pseudopilin。功
能上它們被認為會在膜上形成類纖毛結構，以進行蛋白質分泌的工作。2002 年本實驗
室於Biochem. J.發表論文指出XpsG 蛋白會形成一種類纖毛結構，橫跨內外膜，且XpsG
與XpsH 有交互作用。今年(2003)我們又進一步發現XpsGHJ 三蛋白的結合順序為
XpsG-XpsH-XpsJ，且從XpsJ 為外膜蛋白的特性，推測XpsHJminor pseudopilin 可能扮
演纖毛頂部的腳色。今年我們擬提出一個三年計劃來探討（一）XpsG 與Type II 外膜
分泌系統其他成員XpsLMN 間的交互關係，（二）在試管中重建XpsGHIJ 假纖毛重組
蛋白的交互關係，（三）以電顯與X-射線繞射分析XpsGHIJ 假纖毛重組蛋白。上述實
驗的成功對十字花科黑腐病菌Type II 外膜分泌機轉的瞭解，將有重大幫助。