開發新種去氧核糖核酸鑑識脢(Restriction Endonucleases)並鑑定其特性

我們計畫利用甲基化依據去氧核糖核酸限 制�的基因系統來篩選出絕大部分的去氧核糖 核酸鑑識�的基因,並決定其辨認排列次序與 切斷位子.甲基化依據去氧核糖核酸限制�的 基因系統可被分為三大類:(1)mcr A.認識同時切 斷在DNA上的CG辨認排列次序,而這個C是被甲基 化;(2)mcr B.認識同時切斷在DNA上有GC辨認排列次 序,而這個C是被甲基化;(3)mrr.認識同時切斷在 DNA上有GAC或CAG辨認排列次序,而這些A是被甲基 化.一般來說去氧核糖核酸鑑識�的基因與其 相對的甲基�基因在染色體的DNA上排列的非常 靠近或互相重疊.為了要分離去氧核糖核酸鑑 識�的基因,我們首先要分離相對的去氧核糖 核酸甲基�的基因,之後再從這個已知含有去 氧核糖核酸甲基�的繁殖體菌株來分析相對的 去氧核糖核酸鑑識�基因存在.因為甲基化依 據去氧核糖核酸限制�已被分離但無生化活性 ,因此我們選用其基因系統來幫我們篩選大部 分的去氧核糖核酸鑑識�的基因,我們已利用 mcrB系統分離到很多DNA甲基�的基因與它們相 對的去氧核糖核酸鑑識�基因.現在,我們將要 建立mcrA與mrr系統來分離更多新的DNA甲基�與其相對鑑識�的基因.