甘醇酸對人類皮膚角質細胞與皮膚癌細胞之細胞凋亡作用研究

研究目標：
果酸泛指化學結構上alpha碳含有氫氧官能基的有機酸，其中以甘醇酸(glycolic acid)最廣泛的應用於化妝品與皮膚淺層換膚之用。有研究顯示外敷甘醇酸對紫外線照射的皮膚具有光保護、抗發炎與抗氧化的效果，但是亦有報告指出外敷10%甘醇酸會增加皮膚對紫外線的光敏感作用，意味即使在使用含低濃度的甘醇酸化妝品時也可能增加皮膚的刺激性與光敏感；此外，我們先前利用人類白血病細胞株HL-60的研究顯示有誘發HL-60產生細胞凋亡(apoptosis)，但是相對於另外的實驗以紫外線照射皮膚角質細胞HaCaT，甘醇酸反而阻斷HaCaT的細胞凋亡，因此目前甘醇酸究竟是對皮膚具有光保護或是光敏感作用，仍未有一致的結論；。
研究設計及預期成果：
本計畫主要在探討低濃度的甘醇酸對於皮膚角質細胞毒性(細胞週期停止)與引起細胞凋亡的作用，我們預計使用3種角質細胞進行實驗：正常皮膚角質細胞、HaCaT細胞與皮膚基底癌細胞；並比較甘醇酸作用在3種角質細胞毒性與引起細胞凋亡程度上之差異，並進一步研究甘醇酸導致細胞週期停止與引起細胞凋亡的分子機轉。角質細胞在不同濃度、酸鹼度的甘醇酸、作用不同的時間，首先我們以顯微鏡觀察細胞凋亡的特徵變化，以流式細胞儀檢測細胞存活率、細胞週期分析、細胞凋亡百分比、粒線體膜電位、與活性氧變化的測定；也利用電泳分析DNA ladder；並抽取蛋白質進行西方墨點轉漬以測定細胞週期調控蛋白cyclins或CDKs表現的變化，也測定細胞凋亡相關蛋白如Bcl-2, Bax, Bak, cytochrome c, caspase-8, -9 與-3的表現情形；此外選用IL-8作為評估甘醇酸導致早期發炎反應的指標。本計劃的執行希望能建立研究果酸對於皮膚角質細胞毒性與細胞凋亡作用的模型，更有助於瞭解果酸對皮膚的影響。