微囊藻毒與多摩酸之酵素免疫分析法的建立

藻類毒素中的微囊藻毒(Microcystin)和多摩酸(Domoic acid, DA)污染飲用水源、藻類產品與海產食品而導致食品中毒案例日趨嚴重，為了建立一套有效的微囊藻和多摩酸的分析方法，及進一步探討微囊藻毒是否具有生化毒性及基因毒性等安全考量，本計畫的第一年總目標在於微囊藻毒與多摩酸專一性抗體的產生與酵素免疫分析法之建立，其中包括下列子目標:1. 產生對於Microcystin 和DA具有專一性的單株抗體; 2. 建立Microcystin 和DA之單株抗體為基礎之酵素免疫分析法; 3. 以酵素免疫分析法分析水源與藻源食品中Microcystin 和DA的含量與分佈。為了達到此一目標計劃以小分子連接方法來分別合成微囊藻毒和多摩酸與載體蛋白質的接合物，然後免疫Balb/c老鼠，接著以融合瘤的技術將老鼠脾臟細胞與NS-1骨髓瘤細胞進行細胞融合後，分別篩選出對微囊藻毒和多摩酸有專一性融合瘤細胞以生產其單株抗體，然後利用此一單株抗體來分別建立微囊藻毒和多摩酸的直接競爭型酵素免疫分析法(direct competitive ELISA)以用來分析飲用水、藻類產品與海產食品中此二類毒素的含量與分佈。 本計畫中的研究成果預期能夠提供一套高靈敏度而且簡單快速的分析方法來分別測定 測定微囊藻毒和多摩酸的含量與分佈情形，避免人類及動物體食用遭受伏藻類毒素污染的飲用 水及海產食品，以防止中毒產生。