探討Connexin基因Bbeta 群在學習語言前非症候群性聽障中所扮演的功能角色

聽障可因遺傳基因突變或環境因素，或兩者兼之引起的。約有千分之一嬰兒在出生時罹患重度聽障，在已開發國家約有60%個案是遺傳因素，目前已知有59個基因的突變會導致聽障，各基因的致病機制不盡相同，非常複雜。而耳蝸內影響離子濃度恆定性之相關基因在造成遺傳性聽障上扮演重要角色。在過去幾年我們實驗室針對K+ 再循環(recycling)和維持耳蝸內K+濃度相關基因Connexin (Cx)基因族 (Cx26、Cx29、Cx30、Cx30.3、Cx31 及Cx43)，我們已經分析120位聽力正常人及260位語言學習前聽障患者，在這篩檢中我們已經找到這些基因的一些突變點，在過去的一些文獻中常指出同一基因在不同位置的突變常會產生功能上的差異。然而目前對於我們實驗室所發現的突變所產生的突變蛋白對功能的影響和是否會影響到其他基因蛋白質的功能，除了實驗室這幾年來做了一些研究獲得一些結果外，其餘尚未清楚。另外這幾年我們實驗室也建立了一些探討Cx基因功能的技術。因此本計畫的研究動機主要是利用實驗室所建立的技術和研發一些新技術針對Cx基因β群蛋白(Cx26、Cx30、Cx30.3及Cx31)之間彼此的關係和突變後對其功能的影響和彼此之間所造成的影響，以瞭解Cx基因β群蛋白在耳蝸內K+ 再循環(recycling)和維持耳蝸內K+濃度中所扮演的功能角色，以釐清造成聽障的致病機制。
這二年的計畫中我們將依據我們在語言學習前聽障患者中所發現Cx基因β群 (Cx26、Cx30、Cx30.3及Cx31)的突變進行功能分析，首先我們利用微脂粒基因轉殖方法將各種正常和突變的基因轉殖入(transfection) HeLa細胞瞭解其在細胞內的表現位置，進一步的利用染料轉移(dye transfer)技術和電生理功能來探討Cx基因突變後對gap junction的功能是否有影響。在除了上述方法外，我們也將利用Tet-On蛋白表現系統(Tet-On indicuble expression system)來探討各種Cx基因β群之間或異型結合子(heterozygous)突變的交互作用。同時我們也將研究Cx30基因 5』端在聽障的成因上所扮演的角色和以老鼠耳蝸為模式來瞭解Cx基因β群蛋白在耳蝸內所分佈之相關位置。相信這二年計畫如能獲得支持將對Cx 基因β群造成遺傳性聽障的成因和機制有更深入的瞭解。