與體積調節相關之鈉鉀氯共同運輸之研究

細胞如何在變動的環境中調節其體積，是細胞的重要功能之一。本計劃將探討與調
節性細胞體積增加(RVI)有密切關係的鈉鉀氯共同運輸(Na+/K+/Cl- cotransport)系統。
本計劃將分為兩個階段。在第一階段，我們將探討一些重要的細胞內訊息途徑
(intracellular signaling pathways)對於血癌細胞(MEL cells)中因RVI 而活化的鈉
鉀氯共同運輸的影響。這些細胞內訊息系統包括protein kinase C (PKC)， myosin light
chain kinase (MLCS)，及protein tyrosine kinase (PTK)等。我們將觀察這些kinases
的活性在MEL 細胞處於RVI 狀態下的變化情形，並以這些kinases 的特殊抑制劑
(inhibitors) 來測定它們對鈉鉀氯共同運輸的影響。在第二階段的計劃中，我們將
clone 及sequence 這些MEL 細胞中的鈉鉀氯共同運輸體(Na+/K+/Cl- cotransporter)。
我們將萃取MEL 細胞中的Total mRNA，再以RT-PCR 的方法取得一段DNA 片段後，以此
DNA 片段篩選整個cDNA library。所得之full-length cDNA 將其sequences 解讀後再
以電腦分析其組成。藉由以上的研究，我們可以多方面獲知Na+/K+/Cl- cotransport 在
RVI 狀態下的調節機轉(regulatory mechanisms)及Na+/K+/Cl- cotransporter 的分子組
成及其結構。