探討Slit2基因影響肺癌細胞的生長與侵犯之訊息傳遞路徑

Slit2是一個分泌型蛋白，在中央神經系統之軸突遷徙中扮演一個排斥性的腳色。Slit2透過Robo1受體，使得軸突穿越中央線只有一次的機會。此外Slit2並扮演了許多生物功能，如細胞移動、神經軸突分支的形成、及調控免疫反應等。在許多癌症中，slit2基因的promoter有過度甲基化的現象，暗示著slit2扮演抑癌基因的角色。然而，slit2也會造成黑色素瘤的血管新生。
約95%的台灣女性肺腺癌，其slit2的表現被抑制。分析CL1系列之肺癌細胞株(楊绊池教授所建立)時發現，低侵犯性的CL1-0肺癌細胞株之slit2的表現很高;而在高侵犯性的CL1-5及F4細胞中，slit2的表現很低。欲了解slit2的抑癌功能，我們利用RNA干擾技術降低CL1-0細胞之slit2表現，並在CL1-5細胞中將slit2進行過度表現。這兩種實驗發現，高表現量的slit2會抑制癌細胞的生長。同時，高表現量的slit2抑制了CL1-5細胞的移動及侵犯的能力。由於Slit2是一個具有抑癌特質的分泌型蛋白，它可能成為一個重要的癌症治療標的基因。為了達成此一目標，必須徹底了解Slit2蛋白的訊息傳遞路徑。
欲了解slit2抑癌機制之訊息傳遞路徑，我們計劃進行如下的實驗: (i) 研究Slit2 蛋白被切割後，其N-terminal和C-terminal蛋白片段之抑癌功能。(ii) 探討已知之4種Robo受體中，那一種與Slit2在肺癌中抑制細胞生長與侵犯能力有關。 (iii) 如果Robo受體無法完全傳遞Slit2抑癌機制有關之訊息傳遞，我們將利用yeast two-hybrid系統尋找其他與Slit2有結合的蛋白。(iv) 利用微矩陣分析Slit2訊息傳遞之下游基因。(v) 鑑定能區分出抑制細胞生長或抑制細胞移動/侵犯之Slit2小片段蛋白。以上的實驗將會在細胞及動物體裡嚴謹的進行。