Project title
93學年度國家科學及技術委員會補助研究計畫
Acronym
專題研究計畫
Internal ID
NSC93-2320-B040-024
Principal Investigator
Status
research project
Start Date
August 1, 2004
End Date
July 31, 2005
Organizations
中山醫學院毒理學研究所
Partner Organizations
Project Web Site
Options
探討多環芳香烴於肺癌細胞迴避G1期防禦及抗凋亡機制
Description
B[a]P 為一種廣泛存在於環境中的多環芳香烴類致癌物質。細胞週期的失控
及細胞抗凋亡能力的提升與腫瘤的惡化息息相關。為了釐清B[a]P 造成不同p53
狀態的細胞週期影響，我們分析了B[a]P 對於H1299, H1355, H23, CH27, Calu-1,
H226 及CL3 等肺癌細胞株之細胞週期影響，發現B[a]P 會造成H1355 細胞逃脫
G1 停滯的命運且促使S 期細胞週期停滯及CL3 細胞的G2/M 期細胞週期停滯。
當細胞受到了傷害，卻無法進入由p53 所主導G1 期的細胞週期停滯時，並累積
在細胞週期的S 期，然而帶有受傷的細胞在細胞複製時則可將突變傳至子細胞。
為擬嘗試釐清B[a]P 造成突變型p53 細胞的S 期細胞週期停滯之機制，利用西方
點墨法分析與細胞週期調控蛋白，如phospho-Chk1, Cdc2, Rb, p53, p21 及PCNA
的表現。已知UV 或IR 造成ATM, ATR 等激.活化而得知p53 不同的磷酸化位
置，因此我們擬利用不同磷酸化位置p53 抗體，探討B[a]P 造成何種激.活化及
如何影響MAPK 的活化。並以ERK 專一性抑制劑 (PD98059)及由Vaziri Cyrus
慨贈的野生型Chk1 及突變型Chk1 腺病毒載體轉染實驗探討是否影響 B[a]P 所
誘導的ERK磷酸化及S 期的細胞停滯。擬使用EMSA分析H1355 細胞核內c-Myc
與E-box 的結合活性來研究p-ERK 的下游蛋白，c-Myc 也是否會因為B[a]P 而活
化。研究B[a]P 會如何促進COX-2(環氧化.-2)的表現與提升細胞抗凋亡能力的
關係。以期闡釋B(a)P 造成細胞增殖及細胞抗凋亡的二個機製造成腫瘤惡化。
及細胞抗凋亡能力的提升與腫瘤的惡化息息相關。為了釐清B[a]P 造成不同p53
狀態的細胞週期影響，我們分析了B[a]P 對於H1299, H1355, H23, CH27, Calu-1,
H226 及CL3 等肺癌細胞株之細胞週期影響，發現B[a]P 會造成H1355 細胞逃脫
G1 停滯的命運且促使S 期細胞週期停滯及CL3 細胞的G2/M 期細胞週期停滯。
當細胞受到了傷害，卻無法進入由p53 所主導G1 期的細胞週期停滯時，並累積
在細胞週期的S 期，然而帶有受傷的細胞在細胞複製時則可將突變傳至子細胞。
為擬嘗試釐清B[a]P 造成突變型p53 細胞的S 期細胞週期停滯之機制，利用西方
點墨法分析與細胞週期調控蛋白，如phospho-Chk1, Cdc2, Rb, p53, p21 及PCNA
的表現。已知UV 或IR 造成ATM, ATR 等激.活化而得知p53 不同的磷酸化位
置，因此我們擬利用不同磷酸化位置p53 抗體，探討B[a]P 造成何種激.活化及
如何影響MAPK 的活化。並以ERK 專一性抑制劑 (PD98059)及由Vaziri Cyrus
慨贈的野生型Chk1 及突變型Chk1 腺病毒載體轉染實驗探討是否影響 B[a]P 所
誘導的ERK磷酸化及S 期的細胞停滯。擬使用EMSA分析H1355 細胞核內c-Myc
與E-box 的結合活性來研究p-ERK 的下游蛋白，c-Myc 也是否會因為B[a]P 而活
化。研究B[a]P 會如何促進COX-2(環氧化.-2)的表現與提升細胞抗凋亡能力的
關係。以期闡釋B(a)P 造成細胞增殖及細胞抗凋亡的二個機製造成腫瘤惡化。