酵母菌過氧化體ABC運輸蛋白PXA1及PXA2的結構與功能關係研究

過氧化體是真核細胞中脂肪酸進行芻氧化作用的重要胞器。目前已知人
類過氧化體膜上有四個ABC 運輸蛋白(ATP-binding cassette transporter)，其
中的ALDP 參與極長鏈脂肪酸之芻氧化作用，當此蛋白基因發生變異時，會
導致腎上腺腦白質退化症(簡稱為ALD)。然而，到目前為止仍不清楚ALDP
的功能為何。目前的證據指出，ALDP 與其他兩個過氧化體ABC 蛋白
(ALDRP 及PMP70)會形成同源及異源二聚體。酵母菌中也有ALDP 及
PMP70 的同源性蛋白，分別為PXA1 及PXA2。生化及遺傳的證據指出，
PXA1 及PXA2 是以異源二聚體參與長鏈脂肪酸的芻氧化作用。然而，這些
二聚體的證據皆來自於免疫共沈澱、遺傳學上的分析及蛋白質穩定的相關
性，這些方法無法測定分子量而不能完全證明是否為二聚體，也無法排除同
源複合體存在的可能性。因此，我想要研究酵母菌PXA1 及PXA2 蛋白複合
體的構造及功能之間的關係。我們的研究目標如下：(1)證明PXA1 及PXA2
是否會形成同源複合體、是二聚體還是寡聚體(2)複合體聚合過程是否受核
甘酸調控(3)在PXA1 上構築相對於ALD 致病的突變，分析突變對蛋白功能
及複合體結構的影響(4)以純化的過氧化體建立in vitro 脂肪酸運輸分析系統
(5)在微脂粒中重組成有功能的運輸蛋白，並分析影響蛋白功能的因素。這
些方法將使我們清楚知道複合體的功能及其組成，並賦於ALD 的突變新的
意涵。