果酸與紫外線B對人類皮膚角質細胞凋亡相互影響之作用機轉

果酸(α-hydroxy acids)泛指化學結構上alpha碳含有氫氧官能基的有機酸(α–hydroxy acid)，其中以甘醇酸與乳酸最廣泛的應用於化妝品與皮膚淺層換膚之臨床治療。研究顯示外敷果酸對紫外線照射的皮膚具有光保護、抗發炎與抗氧化的效果，但也有報告指出果酸會增加皮膚對紫外線的刺激性與光敏感作用，此種相互矛盾的情形亟待進一步的研究加以釐清。
紫外線是造成皮膚光老化最重要的因子，以紫外線照射皮膚角質細胞可以造成細胞的氧化性傷害和引發細胞凋亡作用。我們先前的研究證實了甘醇酸與乳酸均可引發人類皮膚角質細胞 (HaCaT cells)的凋亡作用，也發現此凋亡作用的機轉是經由粒線體途徑而誘導。
本研究擬以人類皮膚角質細胞HaCaT在培養基中加入不同濃度之甘醇酸或乳酸，再加上紫外線B照射作用，以研究甘醇酸、乳酸與紫外線對人類皮膚細胞凋亡相互之影響。並擬收集人類正常皮膚，以培養角質細胞或纖維母細胞，以進行同樣之實驗作為比較。在細胞生物學方面，我們將運用流式細胞儀技術來偵測細胞存活率及粒線體膜電位變化、電泳分析DNA斷裂情形、細胞凋亡相關的蛋白質如: Bax, Bak, Bcl-2、凋亡相關的蛋白水解酵素caspases 3, 8, 9等的活性，及細胞內ROS和Ca2+的離子濃度的變化；我們也將利用共軛顯微鏡技術(confocal microscopy)來證實cytochrome c從粒線體釋放到細胞質的現象。在分子生物學方面，我們擬運用微矩陣分析技術(microarray)找尋與氧化壓迫反應與細胞凋亡相關的基因，並且以RT-PCR技術確認參與此等細胞反應的主要基因及其先後順序與訊號傳遞途徑。
本計畫的執行希望能藉由瞭解甘醇酸、乳酸與紫外線對人類對於皮膚角質細胞毒性與細胞凋亡作用的相互影響，進而建立果酸對於皮膚角質細胞毒性與細胞凋亡作用的研究模式，更有助於進一步釐清使用果酸治療對人類皮膚安全性的問題。