腦內Cocaine and Amphetamine-Related Transcript (CART)神經傳導系統在Amphetamine誘發之毒性及厭食效應之角色探討

自從安非他命 (Amphetamine)被濫用以來，社會各界普遍認為藥物濫用日益嚴重，而衛生署管制藥品管理局也發現台北地區非法用藥盛行率為1.5％，非法用藥種類之前三名為安非他命、大麻、強力膠。因此，除了如何杜絕安非他命的濫用以外，安非他命的毒性機轉探討也是目前很重要的課題之ㄧ。 安非他命對於中樞神經系統的作用，大都來自對於諸多神經傳導物質受體系統的影 響，經由在貯存處游離釋放、阻斷回收、抑制代謝的方式，增加神經傳導物質的作用強度和時間，造成中樞神經的興奮、神經毒性和行為的變化。而目前已有許多研究證實安非他命對於norepinephrine 受體系統的作用，會導致中樞神經興奮；而對於dopamine 受體系統的作用則是產生快感和幻覺，並強化回饋成癮系統 (reward system) ；至於對於serotonin 的回收抑制則先是造成分泌增加，進而因回饋機制導致接受器的敏感度降低，造成serotonin急速消耗，這時候使用者會出現憂鬱、焦慮、注意力不集中、記憶力障礙和失眠問題，而長期使用則會導致腦功能受損和神經毒性。 CART的全名為Cocaine and Amphetamine-Regulated Transcript (古柯鹼和安非他命調控之轉錄因子)。目前研究顯示CART peptide與Amphetamine或古柯鹼等興奮性濫用藥物之作用有關，也有許多的文獻指出CART 55-102是調控著厭食反應最重要的區域。這結果顯示CART可能是一種內生性的神經傳遞物質，可能會影響許多與厭食反應有關的訊息傳遞，但其詳細機制及其相關的訊息傳遞路徑卻仍不清楚。 雖然安非他命對中樞神經的影響已有許多相關的研究，但對於下視丘及其他腦區的影響及對於CART的影響則仍不清楚，因此本計畫擬 (1)利用大白鼠以「重複注射Amphetamine」的處理方式，每天一次，連續數天。在重複注射期間，每天記錄大白鼠的食物攝取量，完成由Amphetamine誘發之毒性及厭食的影響。(2)利用同樣的模式在重複注射的不同時間犧牲大白鼠，取腦內的下視丘及其他腦區，萃取其蛋白及mRNA，以western blotting、RT-PCR及Real time RT-PCR的分析方式，完成不同時間Amphetamine對下視丘及其他腦區中CART、SOD、ROS及NOS的基因變化及影響。(3)另外，我們擬設計CART的antisense oligodeoxynucleotide，以活體(In Vivo)的動物為材料，在Amphetamine注射前，將CART的antisense oligodeoxynucleotide直接注入下視丘PVN部位，由攝食行為的改變及CART基因的表現，觀察改變CART的antisense對Amphetamine之影響。並進一步觀察在CART antisense的注射下，大白鼠下視丘及其他腦區中SOD、ROS及NOS的基因變化及影響。(4) 最後，我們擬利用western blotting及EMSA的分析方式，探討經由Amphetamine處理大白鼠其下視丘及其他腦區一些常見的transcription factor如NF-kB、c-Jun、c-fos及JNK其蛋白質表現及其與相關DNA結合能力的變化。