探討Slit2基因在肺腺癌中扮演的角色及訊息傳遞路徑

Slit2 是分泌型的蛋白，它的受體是Robo 蛋白。Slit2 最初發現於大腦的中
線，功能是使commissural axons 通過大腦的中線後，不再度穿過中線。此
外，Slit2 會影響神經細胞的遷徙，白血球的趨化作用，肌肉細胞的移動等。
最近，有研究指出slit2 扮演著抑癌基因的角色。相反的，Slit2 也具有促進
腫瘤血管增生的功能。為了尋找與肺腺癌形成有關的基因，我們利用一位女
性肺腺癌病人之組織建立了精簡雜交基因庫，而發現了slit2。利用
RT-realtime PCR 及基因微矩陣分析肺腺癌病人，發現slit2 於癌組織裡的表
現被抑制了。此外, slit2 的表現在CL1 系列細胞株中,隨著細胞之侵犯能力增
加而減少。此系列細胞株之侵犯能力為CL1-0 < CL1-1 < CL1-5。Slit2 於
CL1-5 之表現量約為CL1-1 表現量之1%。欲瞭解Slit2 在肺腺癌扮演的角
色，利用RNA 干擾反應將CL1-1 裡slit2 的表現量降低時, 細胞的生長速度
降低了，並影響colony 重疊的能力。這些現象與先前所認知的slit2 扮演著
抑癌基因的角色相反。由於CL1-1 細胞中發現了大量缺失Exon15 之slit2
mRNA，而Exon15 位於Slit2 的第二個leucin-rich repeat，此leucin-rich repeat
扮演著與Robo 結合的角色。因此，我們認為Exon15 的缺失可能造成
dominant negative 或gain of function 的突變，這可以解釋slit2-RNAi 所產生
的現象。本計畫想利用肺癌細胞株探討幾個問題：(1) 研究Slit2 在肺腺癌
中對細胞的生長及侵犯性所扮演的角色(2)研究缺乏Exon15 之Slit2 具有什
麼功能(3)鑑定4 個Robo 蛋白家族中，那些具有傳遞Slit2 訊號的功能(4)尋
找被Slit2 調控的下游基因(5)探討切割Slit2 成兩個蛋白片段與Slit2 在肺腺
癌所扮演角色的關係。