探討薯蕷皂對停經大鼠之神經免疫功能的影響---一併探討細胞層面之效果

手術切除卵巢，或是隨著年齡老化所出現的停經，都會導致體內雌性素及黃體素之濃
度降低，而且「發炎性細胞激素」（proinflammatory cytokines）的濃度會增加，並且經常伴
隨出現焦慮、憂鬱及失眠等「停經症候群」。細胞激素除了會在周邊器官媒介發炎反應，也
會在中樞神經系統引發焦慮、失眠、厭食及睡眠障礙；具有上述精神行為異常症狀的患者
其血液裡壓力賀爾蒙cortisol 之濃度也不正常。但是目前並不清楚停經後之精神症狀是否與
「神經免疫功能」（neuroimmunological function）失調有關。薯蕷皂.（diosgenin）是山藥
（或稱為淮山）所含的重要活性成分之一，其化學構造與類固醇相似，主要被用來做為加
工製造性賀爾蒙與cortisone 的原料。山藥長久以來廣泛應用在中醫藥領域，治療停經症候
群及發炎性疾病，例如骨質疏鬆症及類風濕性關節炎。雖然服用山藥或薯蕷皂.不會增加
停經者血液內性賀爾蒙濃度，但是可以改善停經所造成的腎上腺皮質腫大現象，因此推測
薯蕷皂.可能經由調節其他類固醇賀爾蒙系統或神經免疫系統以達成療效。再者，目前並
沒有合適的停經細胞模式，可資探討在停經、缺乏動情激素調控下，薯蕷皂.對神經細胞
或一般細胞的影響。本計畫擬在2 年期間完成下列研究工作：
第一年：釐清薯蕷皂.對切除卵巢大鼠之行為、血液中cortisol 與腦組織內細胞激素之
影響：將Wistar 大鼠之卵巢切除一個月後，以高腳十字迷宮（elevated plus-maze）測量其焦
慮程度，而後每天經口餵食薯蕷皂.（0、10、50 或100 mg/kg）連續4 週，然後再測試其
焦慮程度之變化，而後使用往復箱（shuttle box）進行「習得無助」（learned helplessness）
電擊處理，隔天進行主動逃避試驗（active avoidance test）來測量動物之憂鬱行為。行為實
驗結束2 天後，採取動物之血液及腦組織（大腦皮質、前額葉皮質、杏仁核、紋狀體及海
馬回等區域），以放射免疫分析法測量血液裡cortisol 之含量，並以酵素接合免疫吸附法測
量血液及腦組織裡細胞激素例如interleukin-1（IL-1）、IL-2、IL-6 和tumor necrosis factor-alpha
（TNF-α）之含量，以探討飲食補充薯蕷皂.是否可以改善停經動物之焦慮及憂鬱行為，並
釐清cortisol 與神經免疫系統在此之角色。
第二年：嘗試建立細胞層次的停經模式，並探討在停經缺乏雌性素或缺乏雌性素受體
之情況下，薯蕷皂.對細胞激素、細胞週期和細胞凋亡的影響：以基因干擾技術，藉由
oligofectamine protocol 將雌性素受體（ ER-α ） siRNA 轉殖入神經細胞株NG108-15
（neuroblastoma glioma cell）與乳房上皮細胞株（MCF-7 和Hs 578 T），將ER-α 的基因關閉，
模擬停經後細胞缺乏雌性素刺激的狀況，而後將各細胞株施予薯蕷皂.（5、10、20 或40 μ
M）處理（6、12 或24 hr），然後測量細胞株釋放細胞激素之功能，並以流式細胞樣品分析
法測量處於細胞週期中的G1/S 或G2/M 週期的細胞數比例，並偵測細胞激素及細胞凋亡
（apoptosis）調節蛋白Fas/Fas ligand、Bcl-2 和caspase 3 的含量。
本研究之結果可以進一步釐清薯蕷皂.對停經後精神症狀之療效，並推論「心理-神經-
免疫」功能（psychoneuroimmunological function）與cortisol 的角色，並嘗試在細胞層面探
討停經後細胞生理之相關議題