人類肝細胞癌內蛋白激酵素C異構體的異常功能與基因調節之研究

蛋白激酵素C（Protein Kinase C﹔PKC）是一種鈣和磷酸酯依賴的Ser/Thr 蛋白激酵
素。至今已有10 種PKC 異構體(α、βI、βI、γ、δ、ε、ζ、η、θ及ι) 存在，這些異構體
在不同的組織或細胞中有不同的分佈及功能，且也被認為與腫瘤生長、移動和侵襲有關
(1)。一些證據顯示PKC異構體在癌瘤惡化和腫瘤形成過程中扮演重要角色。例如：過度
表現PKCα在人類乳癌細胞(MCF7) 內會造成生長速率和附著能力增加此時細胞型態改
變﹐包含上皮細胞缺失的現象，此時會增加腫瘤形成(2)。此外，過度表現PKCα 在人
類神經膠質瘤細胞會增加細胞增殖和減少神經纖維蛋白的表現，相反地，過度表現PKCδ
會抑制細胞生長和增加神經纖維蛋白的表現(3)。然而PKC在人類肝細胞癌形成過程的
角色和機制，仍然未知。
最近我們的研究顯示低度分化的人類肝癌細胞株（HA22T/VGH、SKHep1）內PKCα
mRNA的表現都比高度分化的人類肝癌細胞株（PLC/PRF/5、Hep3B 和HepG2）顯著增
加，且PKCα也參與細胞增殖、移動和侵襲的作用(4)。為了瞭解PKCα mRNA過度表現
的機制，我們進行DNA放大和mRNA穩定度測試，結果發現PKCα mRNA過度表現與
DNA放大和mRNA穩定度無相關性。因此我們尋找PKCα promoter上的轉錄因子，結果
發現PKCα過度表現是藉由Elk-1和MZF-1轉錄因子互相結合調控(5)。根據此觀點我們認
為Elk-1和MZF-1轉錄因子調控PKCα表現可能與肝細胞癌形成有關。
為了深入瞭解人類肝癌細胞內PKC 異構體與肝細胞癌形成關係，我們將擴大研究
人類肝癌細胞內各種PKC 異構體的異常功能和基因調控機制。本研究計畫共分三年進
行：【第一年】將檢測人類肝細胞癌和人類肝癌細胞株內PKC 異構體mRNA 的表現，
並使用專一性反譯股寡核甘酸抑制PKC 異構體表現，探討各種PKC 異構體在低度分化
肝癌細胞中的異常功能。另外我們也將深入探討PKCα在人類肝細胞癌內是否透過Elk-1
和MZF-1 的調控。【第二年】將探討Elk-1 和MZF-1 轉錄因子互相結合是否增加PKCα
promoter 上的DNA-binding 的轉錄能力。【第三年】將探討低度分化肝癌細胞株的癌化
作用如移轉作用(migration) 和侵襲作用(invasion)是否透過PKCα訊息傳遞路徑來調
控。結果不僅將幫助我們瞭解人類肝癌細胞內PKC 異構體的的異常功能和基因調控機
制，同時也將提供我們發展新的化學治療策略。