RhoGDIβ於口腔癌轉移中扮演之角色探討

為了探討在人類口腔癌中，新的轉移抑制基因有臨床的重大意義，我們使用人類口腔癌
細胞、利用DNA 微陣列技術(microarray technology)去確認使轉移功能表現降低的基
因。接著我們鑑定此表現的圖形數據，確認這些減弱的基因其中之一，RhoGDI　，在
口腔癌細胞中的表現是down-regulated 的。在侵略性及轉移的腫瘤組織裡，此
RhoGDI　的減少可能與腫瘤轉移有關。RhoGDI　重新表現的細胞可能失去轉移的能
力。我將開始研究RhoGDI　與肺癌轉移發展相關的生化特徵及其所扮演的功能性角
色。除此之外，本實驗室透過yeast two-hybrid 實驗證明RhoGDIβ 能與某一蛋白質激
酶, ZAK,結合。
ZAK 基因是一個含有800 個胺基酸蛋白質激脢，其中包含了一個蛋白質激脢區、一個
Leucine zipper、及一個SAM 區。ZAK 是屬於MAPKKK 家族，能夠活化MAPK 訊息
傳導途徑。在本實驗室發現，當細胞表現ZAK 時，能夠同時活化JNK/SAPK 訊息傳導
途徑及活化NF-κB 轉錄因子。當ZAK 活化JNK/SAPK 途徑時需要利用MKK7。另外
ZAK 亦能調節細胞骨架actin 的結構。
本計劃的主軸為研究ZAK 與腫瘤轉移抑制蛋白(RhoGDIβ)之間的交互關係及其在調控
腫瘤轉移之研究。我們將利用三年的時間來完成此研究；第一年，我們將比較正常細胞
及轉移口腔癌細胞中RhoGDIβ 之表現，以期了解RhoGDIβ 的表現與轉移之關係，並
利用細胞培養及裸鼠系統來研究RhoGDIβ 調控癌細胞爬行、侵襲及轉移之機制。第二
年，我們將探討ZAK 與RhoGDIβ 之間的關係。首先研究ZAK 與RhoGDIβ 之間的結合
區域，並且嘗試研究Rac 蛋白在RhoGDIβ 中造成癌細胞轉移的機制。同時利用微矩陣
研究RhoGDIβ 所調控的基因組，並研究Rac 的表現是否由RhoGDIβ 所調控。爾後我
們將利用yeast two-hybrid 實驗找出在細胞中與RhoGDIβ 結合的蛋白質，以期更加了
解RhoGDIβ 在細胞中訊息傳導的機制。第三年，將利用RNAi 技術來減低RhoGDIβ 或
ZAK 的表現，以期了解ZAK 與RhoGDIβ 表現降低時對癌細胞轉移的影響，並研究
RhoGDIβ 被磷酸化的位置，以期了解ZAK 對RhoGDIβ 的調控機制。