人類D型肝炎病毒複製時之專一性

人類的D型肝炎病毒(HDV)具有一個環狀單股的核酸(RNA)做為它的基因體。因此，使用其RNA為鑄模來做為合成新基因體之用。到目前為止，HDV的基因體中，只有發現一個基因。這個基因的產物就是D型肝炎病毒的抗原(HDAg)。比較HDAg和已經知道的核酸聚合脢的序列，無法找到相似的地方和功能，所以，D型肝炎病毒之所以能夠在動物細胞內複製，一定使用到細胞攜帶的核酸聚合脢(RdRP)。曾經有文獻報告指出，核酸聚合脢的pol II可能是主要的核酸聚合脢用來複製HDV，可是pol II 只能使用DNA為鑄模，如何扭轉它的專一性，還未有任何合理的解釋。由於缺乏適合的模式研究被感染的細胞，以及可靠的試管內定性，使得尋找這個HDV專一的核酸聚合脢無法有效的進展。D型肝炎病毒是唯一的會感染人類而且只在染色體外複製的RNA病毒，而且D型肝炎病毒進入細胞之後的複製和B型肝炎病毒無關。我們知道細胞內未知的核酸複製組合可以複製D型肝炎病毒，但是其中所含有之成分以及它的運作機制並未清楚地被證明出來。我們已經建立了一個使用HDV的RNA/HDAg (RNP)transfection的感染細胞模式，在這個模式中完全避免了可能成為鑄模之HDV的DNA，因此適合使用於鑑定只用RNA為鑄模之核酸聚合脢的組成。所以，在本計劃中，我們希望能夠達到下列的主要目標：1. 從人類細胞中鑑識出與RdRP相關的組合成員。包括HDV之核酸啟動子及細胞之調節基因2. 建立起一個可靠地、具有HDV的RdRP專一性的試管內合成RNA之方法，以供分析。