動情激素受體在乳癌生成進程之角色探討

乳癌是台灣地區婦女好發癌症的第二位，每年約有近2000 名新發生的個案，尤
其是發生率及死亡率在逐年上昇中，更值得我們加以重視，已是一個不容忽視的公
共衛生問題。經由過去的臨床研究結果發現，導致乳癌患者疾病惡化和死亡的主要
成因，是基於癌細胞發生腋下淋巴或者是遠端組織器官的腫瘤轉移，以致對生命產
生嚴重的威脅性。因此，對婦女乳癌而言，探討乳癌癌化進程乃至於發生淋巴轉移
的機轉，便有其特殊意義的急迫性。文獻指出，對於腫瘤侵襲的過程是複雜動態、
而且是透過多重基因異常的共同表現，致使其癌細胞進行多步驟且是程序性的進行
轉移。其中，經由動情激素受體(estrogen receptor; ER)的表現雖被視為是癌症進程發
展、甚至是預後的重要指標。然而，ER 分子的表現影響所及的訊息傳遞轉錄活化
過程和乳癌發生乃至於癌細胞轉移的分子機制至今仍不清楚。因此，本研究的緣起，
則是就分子遺傳層面來探討因為ER 表現差異對婦女乳癌腫瘤進程發展的角色。在
腫瘤細胞的發展進程中，細胞分裂素(cell cyclin)、細胞基層膜(basement membrane)、
胞外基質(extracellular matrix)組成等標的基因的表現差異，往往關連到細胞的增
生、分化並維繫細胞間接合的訊息傳導等作用，是影響腫瘤細胞增生癌化以致於惡
化的關鍵因子。所以本研究則是要針對乳癌患者之淋巴轉移的組織，根據其ER 表
現的差異，來探究細胞分裂素Cyclin D1、細胞表面結構mammaglobin A、細胞接觸
蛋白b-catenin、細胞結構分解蛋白Stromelysin-3 (MMP11)和轉移腫瘤抗原
(metastatic tumor antigen-1，MTA-1)的表現與乳癌細胞惡化進程的關聯。經由ER 表
現的觀點，針對多基因的複合性表現程度差異，將對台灣地區婦女乳癌發展進程提
供重要關鍵的研究訊息。
(2)目的：
藉由分子遺傳流行病學和細胞遺傳學實驗分析cyclinD1, mammaglobin A、
b-catenin、MMP-11 (Stromelysin-3) 和MTA1 之m-RNA 在乳癌組織異常的表現，並
探討這些基因和動情激素受體在乳癌生成和轉移過程中所扮演的角色。
(3)方法：
在分子遺傳流行病學部分，擬定計畫收集：
(i) (a) 100 例婦女乳癌病患發生乳癌淋巴轉移和(b)100 例乳癌病患無乳癌淋巴轉移
之分組。將其具有成對配合的乳癌癌組織及其相鄰的正常(非癌)組織(共計400
個組織檢體)；
(ii)以雷射顯微擷取(laser capture microdissecion)分離癌組織，以real-time RT-PCR
技術針對Cyclin D1、mammaglobin A、b-catenin、MMP-11 (Stromelysin-3) 和
MTA1 的基因表現，來分析比較這些摽的基因在乳癌組織和其相鄰正常組織之
間的表現差異；
(iii)藉由對ER 的表現性為基準，關連於多重基因表現的剖面進行多變相統計分
析，探討與乳癌發生、分期和腫瘤轉移的危險性評估，以作為乳癌發展進程的
分子標記。在細胞遺傳學的研究部分，
(i) 培養乳癌細胞株MCF-7 (ER(+))進行基因干擾實驗small interference RNA(ER-a
siRNA)，將上述乳癌細胞株ER-a關閉(gene knockdown)。另外，將Hs578T
(ER(-))轉殖入ER 基因，透過動情激素受體的活化進行誘導表現；
(ii) 探討乳癌細胞株因ER 的誘導表現和關閉前後，其Cyclin D1, mammaglobin A,
b-catenin, MMP-11 (Stromelysin-3) 和MTA1 等基因在不同細胞轉殖株其表現
上的差異；
(iii)將ER-a siRNA 基因關閉和宿主細胞轉殖入ER-a基因的乳癌細胞株進行細胞
侵襲和轉移實驗(cell invasiveness and migration assay)，以分析癌細胞惡化和轉
移的進程。
(4)實施進度：
本研究預計以兩個年度來完成整個計畫。
(5)預期效果及其重要性：
總結而言，本研究藉由多基因複合性表現的研究，能夠更全面性的探討透過動情
激素受體對癌症發生和淋巴轉移的分子機轉。除了能夠瞭解動情激素受體和乳癌發
展進程以至於乳癌惡化的預後評估，並同時找出適切的乳癌臨床分子遺傳標記。其
研究成果將有助於釐清動情激素受體的表現對乳癌細胞侵襲轉移的發展過程，提供
重要關鍵的資料外；並有助於以動情激素受體為標的，發展有效的乳癌治療策略。