原兒茶酸抗動脈粥狀硬化機轉之研究(II)

許多研究指出，氧化修飾的低密度脂蛋白 (lipoprotein, LDL) 應是造成動脈粥狀硬
化的起始因子，因此，預防這類膽固醇的氧化修飾應可預防動脈粥狀硬化。在一些合
成藥物及天然食物成分中，有許多被報告具有抑制LDL 氧化修飾的能力，甚而在臨床
實驗中也被發現具有預防或治療動脈粥狀硬化的成效。這類物質中較為一般民眾所接
受者當以天然成分者優先，如紅酒中的resveratrol 與其他多酚類化合物。由於抗氧化
與抗動脈粥狀硬化兩者之間實有密不可分之關連，因此由食物或天然植物中找尋有效
的抗氧化劑更為未來發展的方向。
原兒茶酸 (protocatechuic acid, PCA)是一種簡單的酚類化合物，由洛神的乾燥花
分離而來，中醫本草藥典記載，洛神花屬於錦癸科 (學名Hibiscus Sabdariffa Linnaeus,
HS)中洛神癸的花，具有解熱、利尿、降血壓等功能，此類乾燥花常被當作夏季的清
涼飲料。PCA 這種經乾燥而得的洛神花萃取物，廣佈於蔬菜、水果、花和胡桃中。PCA
在各項文獻中被提及最多者為其良好的抗氧化特性，由我們先前的研究中也已經發現
PCA 在試管實驗 (in vitro)中具有抗LDL 氧化的能力；並且在ex vivo 實驗中，PCA
對於氧化型LDL (oxLDL)所引起的巨噬細胞之凋謝死亡具有抑製作用並可減低泡沫細
胞之形成，因此在本實驗中我們要進一步以來探討其作用之分子機轉，以期能在PCA
抗動脈粥狀硬化形成的過程中提供更完整的證據，以利一般民眾參考。
本計畫進行的機轉探討在93 年度的計畫中我們已發現在oxLDL 處理下，PCA 在
抑制巨噬細胞凋謝死亡作用之分子機轉可能包含：(1) 影響粒線體之膜電位；(2) 影響
粒線體膜蛋白之表現，包括cytochrome c, Bcl-2, Bax 等蛋白；(3)增加內生性維生素
E；(4) 減少細胞內外自由基之含量。因此在本年度之計畫中我們將探討PCA 在抑制
泡沫細胞形成過程之分子機轉，我們擬以THP-1 細胞株進行此部份實驗，在預先處理
PCA 後， 我們計畫以oxLDL 誘發THP-1 形成泡沫細胞或
12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) 誘發THP-1 進行分化，在探討相關蛋
白及調節因子之後，歸納整體分子機制。研究內容包括 (1) 以 RT-PCR 的方法測定
相關基因的表現量，包括scavenger receptor 如CD36, ABCA1 及transcription factor
如PPARα, PPARβ/δ, PPARγ等，是否在PCA 處理之下會有所變化；(2) 以Westernblotting 測定相關蛋白的表現量，包括CD36、ABCA1、PPARα、PPARβ/δ、PPARγ
及c-Jun/JNK 等，是否在PCA 處理之下會有所變化；(3) 以luciferase reporter 的方
式測知PCA 對PPARs 與LXR 是否有干擾作用並觀察其cholesterol efflux 的變化。
從以上的結果，我們將提出PCA 可以預防動脈粥狀硬化的發生，並說明其作用機
轉，由於PCA 廣泛存在於天然且日常食用之蔬果中，因此本研究之結果當可提供更為
科學的數據以利大眾在日常預防心血管疾病上有一正確的知識。