人類乳突瘤病毒16/18之E6/E7在肺上皮細胞基因甲基化之角色研究(I)

本研究室過去之研究結果發現在肺癌患者之肺腫瘤組織中可測到高危險性人類乳突
瘤病毒 16 和18 型DNA 的存在，但HPV 是否參與台灣肺癌患者肺腫瘤的形成則仍需進
一步研究。最近的研究指出致癌病毒感染宿主細胞後除產生致癌蛋白使細胞癌化外，亦會
造成宿主細胞基因的甲基化而導致宿主細胞的腫瘤化。本研究室最近的研究結果也發現
HPV 感染的肺癌患者之肺腫瘤組織中p16 及RASSF1A 抑癌基因甲基化的發生頻率遠高於
沒有HPV 感染之肺癌患者，但HPV 與基因甲基化之間的作用機轉至今仍不清楚。因此本
計畫擬分二年進行，以釐清HPV 感染是否會造成宿主細胞抑癌基因甲基化進而促進肺細
胞腫瘤化。本計畫第一年將利用已轉染HPV16/18 致癌基因E6 或E7 之人類正常肺上皮細
胞之細胞模式進行研究 (此部分細胞由愛荷華州立大學Dr. Klingelhutz 所提供)，利用此細
胞模式分析在肺腫瘤細胞中常見易發生甲基化之各類基因之啟動區過度甲基化情形是否受
HPV E6 及E7 所影響？並瞭解E6 及E7 對基因啟動區過度甲基化何者較具影響？主要影響
在那一類基因？並進一步利用此細胞模式分析E6 及E7 對甲基轉移路徑中所需蛋白
DNMT1、DNMT3b、MBPs、mSin3A 及HDAC 在轉錄及轉譯層次之影響，以瞭解HPV
之 E6 及E7 蛋白如何參與基因的甲基化。並瞭解HPV E6 及E7 蛋白何者對宿主細胞基因
甲基化所產生的影響較大。在明白HPV E6 及E7 對甲基化調控蛋白轉錄及轉譯層次的影響
後，本研究之第二年計畫將進一步探討HPVE6 或E7 引起甲基化之機轉，即HPV 致癌蛋
白對MBP, mSin3A, HDAC 複合體結合之影響，及對此複合體與DNMT 蛋白間交互作用所
產生的影響，以瞭解HPV 致癌蛋白在整個甲基化調控路徑中所扮演的角色。為瞭解細胞
實驗所得之結果是否可在臨床檢體中得到驗證，本年度亦將分析有HPV 感染但無致癌蛋
白表現、有HPV 感染且有致癌蛋白表現及沒有HPV 感染三組肺癌患者肺腫瘤組織中之甲
基轉移酉每 DNMT1 及DNMT3b 蛋白及抑癌基因甲基化之變化情形與細胞實驗是否一致？
並做臨床預後分析，以瞭解HPV 感染是否會經由抑癌基因之過度甲基化而參與肺癌之形
成。本計畫之研究結果將有助於瞭解HPV 感染與肺癌形成之可能性。