大蒜精油及其有機含硫成分－二烯丙基硫化物、二烯丙基二硫化物及二烯丙基三硫化物對於大鼠小腸上皮細胞株IEC−18之一氧化氮合成酶活性之影響

iNOS (inducible nitric oxide synthase)在發炎反應下會被大量活化而產生過量的一氧化氮(nitric oxide ,NO)。NO的增加將增加腸道黏膜通透性及腸道菌轉移(bacterial translocation)機會，已知這是許多重症病患併發敗血性休克、多重器官衰竭甚至死亡的原因之一。因此本實驗以正常狀態及發炎性細胞激素(cytokines)刺激腸道上皮細胞株IEC-18，觀察活體外大蒜精油(garlic oil,GO)及其有機含硫成分--二烯丙基硫化物(diallyl sulfide, DAS)、二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide, DADS)和二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide, DATS)對於細胞產生NO、增生率、代謝活性與細胞iNOS的活性及蛋白質表現之影響。 本實驗先觀察cytokine mix (CM: IFN-γ 200 U/ml、IL-1β 5 ng/ml和TNFα 100 ng/ml )對細胞之增生率、代謝活性以及細胞NO產生的影響。之後再加入0、0.25、0.5、1、2.5、5 μg/ml 大蒜精油(GO)或0、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0 mM有機含硫成分DAS、DADS、DATS，觀察大蒜成分在有無CM刺激下對細胞之增生率、代謝活性以及細胞產生NO的影響。最後觀察在0.25 μg/ml GO、0.01mM DAS、DADS、DATS處理條件下，對於細胞iNOS活性與iNOS蛋白質表現量之影響。 實驗結果發現，CM刺激雖不影響細胞之增生率，但會降低細胞代謝活性；隨著培養時間的增加，相較於對照組，CM組的細胞產生較高量的NO。在CM刺激下，GO與DAS的加入並不影響細胞增生及細胞代謝活性，但隨著GO與DAS加入後，細胞產生的NO有增加的趨勢；DADS降低細胞增生率但不影響細胞代謝活性，對於細胞產生NO量之影響不顯著；至於DATS則隨加入濃度的增加，對細胞增生、細胞代謝活性及細胞產生NO量均有抑制效果。在CM刺激下iNOS蛋白質表現量明顯增加，而在0.01 mM DADS或DATS iNOS蛋白質表現量比CM組增加；且細胞iNOS活性在0.01 mM DATS處理時有下降的情形。 由本實驗結果可得到以下結論是：以CM刺激IEC-18時，細胞代謝活性降低但iNOS表現及細胞NO產量增加。在未以CM刺激下，GO與DAS可增加細胞NO的產生，但DADS與DATS則會降低NO的產生。在CM刺激下，透過iNOS的活化而使細胞產生大量NO，GO與DAS隨劑量增加，細胞產生的NO先增後減；DADS對細胞產生的NO沒有影響；DATS抑制細胞產生NO呈劑量依賴性降低。