大蒜精油及其有機含硫成分-二烯丙基硫化物、二烯丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物-對內毒素誘發大鼠腸道細菌轉移之影響

摘要 敗血和敗血性休克是重症病患主要致死併發症之一，且主要發生原因之一為一氧化氮 (nitric oxide, NO)及氧化壓力增加造成腸道黏膜受損，繼而使腸道細菌轉移至體內。因大蒜精油及其含硫成份有抑菌及抗氧化功能，故本實驗以內毒素 (lipopolysaccharide, LPS) 誘發氧化壓力造成腸黏膜損傷為模式，促使腸道細菌轉移，再觀察經由單一劑量或長期多重劑量灌食大蒜精油及其含硫成份─二烯丙基硫化物 (diallyl sulfide, DAS)、二烯丙基二硫化物 (diallyl disulfide, DADS)、二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide, DATS)對於LPS所引起的氧化壓力、腸黏膜受損和細菌轉移的影響。 本實驗先利用在大鼠腹腔注射5 mg/ml/kg BW的沙門氏桿菌 (Salmonella tryphimurium) 內毒素 (LPS)，注射後0、2、6、18、24小時犧牲，並以注射生理食鹽水0、18小時後之大鼠為對照組，觀察總腸道菌數和革蘭氏陰性菌轉移至腸系膜淋巴結的情形，血漿、肝臟和迴腸黏膜中的NO濃度，並以空腸片段脂質過氧化程度、十二指腸黏膜非蛋白質還原態硫醇含量來表示氧化壓力，最後利用十二指腸、迴腸黏膜的蛋白質含量和迴腸黏膜的DNA含量以及利用組織切片觀察迴腸黏膜的損傷情形。之後再觀察灌食單一劑量大蒜精油 (GO 50, 200 mg/kg BW) 及其含硫組成DAS (0.5 mmole/kg BW)、DADS (0.5 mmole/kg BW)、DATS (0.5 mmole/kg BW) 對注射LPS後細菌轉移之影響。同時亦觀察使用與單一劑量相同濃度的GO、DAS、DADS、DATS進行隔日共八次的長期多次劑量灌食，觀察對注射LPS後細菌轉移之影響。 實驗結果發現，隨著注射LPS後時間增加，血漿、肝臟和迴腸黏膜中的NO含量增加，而空腸的脂質過氧化程度上升，並且十二指腸黏膜的非蛋白質還原態硫醇含量下降，伴隨腸道氧化壓力上升，將使得腸黏膜受損及細菌轉移至體內，但是十二指腸、迴腸黏膜的蛋白質含量和迴腸黏膜的DNA含量在觀察期間則沒有明顯變化。以上結果也顯示在注射LPS 18小時後對於血漿、肝臟和迴腸黏膜中的NO濃度上升、十二指腸黏膜的非蛋白質還原態硫醇濃度下降和腸黏膜的完整性降低均達最大作用，且此時間點和總腸道菌及革蘭氏陰性菌產生最大轉移菌量的時間點結果一致。灌食單一劑量GO及DAS、DADS、DATS可以降低氧化傷害，增加腸黏膜完整性和減少細菌轉移至活體內的菌量，且以DAS組具有統計上的意義，但是對於腸道黏膜及DNA、蛋白質含量則均無明顯的影響。長期多次劑量灌食GO及DAS、DADS、DATS並未減少氧化壓力或改善腸黏膜完整性，但是DAS、DADS、DATS均有降低細菌轉移至活體內的菌量之趨勢。 由本研究結果得到的結論是：GO及DAS、DADS、DATS的單一劑量灌食的確可以經由抗氧化作用減少細菌的轉移量，長期多次灌食GO及DAS、DADS、DATS雖不能明顯減少氧化壓力和腸道受損情形，但是DAS、DADS、DATS仍能降低細菌的轉移量，這是否與長期多次灌食DAS、DADS、DATS促進腸道免疫功能有關尚待進一步探討。