人類多瘤性病毒在臺灣地區感染情形之研究及其基因型之鑑定

人類多瘤性病毒包括JC病毒及BK病毒兩種.在本論文的研究中,以PCR的 方法放大檢體中JC病毒及BK病毒的核甘酸,並以Southern hybridization 確認,藉核甘酸序列分析以瞭解在不同族群中,不同病毒株存在的情行. 本實驗所選擇的族群有平常人75例,孕婦91例(其中有60例同時有羊水的偵 測),自體免疫疾病病人52例,羊水60例以及洗腎病人60例.經過一系列的實 驗後得知,在平常人的尿液中有13.3%(10/75),孕婦有36%(11/31),自體免 疫疾病病人的比率是33.3%(16/48),有羊水配對的孕婦尿液的比率 是22%(10/46)有人類多瘤性病毒的存在,羊水和洗腎病人的尿液中並沒有 發現該病毒的存在. JC病毒和BK病毒的基因型是以病毒基因組中的調控 區為參考.在我們偵查到的JC病毒及BK病毒,都有不同於原始種.在JCV方 面,有臺灣一號,臺灣二號及台灣三號.在BKV方面有臺中一號及臺中二號. 目前為止並不清楚這樣的改變是否對病毒生理及對人體的致病力有無影 響,尚待進一步的研究. 此外,我們發現了一個簡單且靈敏的方法,可以直 接以PCR的方法偵測尿液中人類多瘤性病毒的DNA.尿液只需經過透析及 proteinase K的處理,無需經過超高速離心及DNA extraction的步驟即可 進行PCR.直接以尿液偵測病毒的DNA有量方面的限制,5 ul的尿液是最恰當 的體積,當尿液體積超過10ul,PCR的結果就會從陽性變為陰性.然而,經過 透析移去可能干擾PCR的抑制因子後,尿液的體積可增加至30ul.從尿液直 接以PCR複製病毒的DNA非常方便,且可省去許多步驟,而這些步驟都可能會 造成病毒DNA在萃取過程的流失.