2026-11-092026-11-09https://scholars.csmu.edu.tw/handle/123456789/38110麩胱甘.轉移.(GST)在細胞特有的解毒機制中扮演重要的角色，它可 移除來自細胞外的毒性物質並減少毒性物質對細胞的傷害。本研究室初 步分析117 位非小細胞肺癌病患的肺部組織，發現其中26 位病患的肺組 織中表現同一種短小缺失型態的MDM2 基因(MDM2 mRNA alternative splicing)，而先前的研究也指出這種短小缺失型態的MDM2 基因具有使腫 瘤惡質化的特性。統計分析的結果也發現抽煙患者與MDM2 基因的短小 缺失發生有高度的正相關性；此外以香菸中的致癌物質B[a]P 及其最終代 謝物- benzo(a)pyrene-diol-epoxide （BPDE）處理肺癌細胞(H1355)也發現 會造成MDM2 基因的短小缺失，然而處理正常的人類肺纖維母細胞 (MRC-5)卻無類似的現象。進一步分析兩株細胞內的麩胱甘.轉移.酵素 活性也發現， MRC-5 細胞株的麩胱甘.轉移.酵素活性明顯高於H1355 細胞株；而RT-PCR 分析結果也發現MRC-5 細胞中分別表現麩胱甘.轉 移.酵-Pi、M2 與M4 的mRNA，H1355 細胞僅表現麩胱甘.轉移.酵 -M4 的mRNA。前人的研究指出，麩胱甘.轉移.酵-Pi 在肺部活性的表 現與肺癌的發生有關；然而麩胱甘.轉移.酵-M2 在肺癌發生過程中所扮 演的角色至今仍不清楚。因此，本研究擬探討細胞中的麩胱甘.轉移. -M2 在細胞受到致癌因子-BPDE 傷害過程中是否扮演重要的保護角色， 並進一步研究其是否可調控由致癌因子所誘發之MDM2 基因短小缺失。 首先，本研究擬以RT-PCR 增幅MRC-5 及H1355 細胞中的麩胱甘.轉移 .-M2 及M4 的基因表現，並以自動基因定序儀確定所增幅的麩胱甘.轉 移.序列無誤；進一步將麩胱甘.轉移.-M2 及M4 穩定表現於H1355 細胞株，選擇不同麩胱甘.轉移.表現量的細胞株。同時嘗試以RNA interference 降低MRC-5 細胞GST-M2 表現，並利用競爭性ELISA 偵測 BPDE 鍵結物的含量及nested RT-PCR 評估其是否可有效的降低致癌物質 對細胞的傷害程度及短小缺失MDM2 基因的誘發表現。同時，本研究也 分析細胞週期及相關基因的變化以評估麩胱甘.轉移.-M2 在細胞受到 傷害時所扮演的角色；冀望由不同的角度切入觀察並闡釋麩胱甘.轉移 .-M2 在細胞受到香煙中致癌物質傷害過程中扮演重要的保護角色。麩胱甘轉移雙微染色體短小缺失肺癌Project