2026-11-092026-11-09https://scholars.csmu.edu.tw/handle/123456789/38511文獻指出，多元不飽和脂肪酸參與調控多種基因轉錄作用、影響mRNA穩定 性，在調控細胞生理、生化及代謝反應過程中扮演關鍵的角色。細胞色素P450 負責解毒代謝/生物轉化作用。 目前臨床癌症治療上，CYP 2B1對抗癌藥物 cyclophosphamide 和ifosfamide的活化已被廣泛研究。本實驗室已成功建立 phenobarbital (PB)誘發CYP 2B1表現的細胞模式，對後續探討飲食因子如何調控 CYP 2B1的表現機制提供了可行的實驗工具。本實驗室先前研究證實，n-6多元 不飽和脂肪酸－arachidonic acid (AA)、linoleic acid (LA)及n-3多元不飽和脂肪酸 －eicosapentaenoic acid (EPA)、docosahexaenoic acid (DHA)皆具有負向調控PB誘 發肝細胞CYP 2B1基因表現之能力，其中以AA和DHA抑制效果最顯著。AA被證 實主要是透過其代謝產物PGE2再經PGE2接受器(EP2)活化cAMP-dependent protein kinase A pathway達到此效果，但是DHA的抑制機制仍不清楚。DHA若是 透過COX代謝會生成PGE3而非PGE2，將PGE3添加於初代肝細胞中並不會影響 CYP 2B1基因表現，但以DHA處理初代肝細胞相較於控制組仍可增加胞內PGE2 濃度，因此並不排除DHA可能透過其它訊息傳遞路徑刺激細胞內PGE2的生成， 進而影響CYP 2B1基因表現。 Ceramide為脂肪酸與sphingosine結合而成的高度疏水性分子。除了作為細胞 膜組成分之外，也被視為訊息傳遞分子，在細胞生理代謝過程中扮演重要角色。 文獻指出，哺乳動物細胞中發現acidic、neutral 和alkaline三種不同形式的 sphingomyelinase (SMase)，可將sphingomyelin水解成ceramide；ceramide再經由 ceramide kinase作用形成ceramide-1-phosphate，進而活化cytosolic phospholipase A2 (cPLA2)促使胞內生成AA。許多研究證實，n-3多元不飽和脂肪酸可活化neutral- 或acidic-SMase，顯著增加胞內ceramide濃度。本實驗室初步針對ceramide影響PB 誘發CYP 2B1基因表現作探討，結果發現ceramide可顯著負向調控CYP 2B1表 現，且此抑制效果呈現劑量關係。許多研究顯示，核蛋白接受器constitutive androstane receptor (CAR)的活化與 PB 誘發CYP 2B 基因表現有密切相關。文獻指出，CYP 2B 基因序列promoter 位置上帶有一段對PB 具有高度反應性的DNA 序列，稱之為PB-responsive enhancer module (PBREM)，PBREM 包含兩個DR-4 nuclear receptor-binding motifs，稱之為NR-1 及NR-2。研究證實，當肝細胞給予PB 刺激時，細胞質CAR 會被活化並translocate 至細胞核內，與核內retinoid acid receptor (RXR)結合成 CAR/RXR heterodimers，此heterodimers 再結合至promoter 的DR-4 nuclear receptor-binding motifs，進一步啟動CYP 2B 基因表現。同時，CAR 基因表現與 活化被證實與glucocorticoid receptor (GR)活化有關。推論，GR 的活化也許在PB 誘發CYP 2B1 基因表現過程中扮演重要角色。先前研究發現，GR 的活化與其被 磷酸化位置有關，GR 被磷酸化作用證實與MAPKs 活化有關。n-3 多元不飽和脂 肪酸被證實會影響GR 活化，那n-3 多元不飽和脂肪酸是否可能透過MAPK 訊 息傳遞路徑影響GR 活化進而調控GR-mediated transcription 值得深入探討。 本計畫將分三部分探討DHA 如何負向調控PB 誘發CYP 2B1 基因表現，第 一：DHA 是否可能透過活化neutral-或acidic-SMase 造成胞內ceramide 累積，進 一步磷酸化形成ceramide-1-phosphate，再透過活化cPLA2 進而影響PGE2 生成， 最終影響CYP 2B1 基因表現。第二：GR-mediated CAR transcription 在DHA 負 向調控PB 誘發CYP 2B1 基因表現過程中所扮演的角色。第三：是否與活化特定 MAPK 訊息傳遞路徑進而影響GR 活性有關。Project