2026-11-092026-11-09https://scholars.csmu.edu.tw/handle/123456789/38479最近研究指出，致癌病毒感染宿主細胞，會經由使宿主細胞抑癌基因甲基化，而導致細胞 的腫瘤化，但其作用機轉仍不清楚。本研究室亦發現人類乳突瘤病毒HPV 感染的肺癌患者 肺腫瘤組織中，p16 甲基化的發生頻率遠高於沒有HPV 感染之肺癌患者(Wu et al., 2005)， 且可能是經由甲基轉移.3b (DNMT3b)的過度表現所致(Lin et al., 2005)。已知高危險型 HPV 所轉錄產生的致癌蛋白E6 可經由降解p53 抑癌蛋白而促使細胞的腫瘤化，亦有研究 指出p53 抑癌蛋白可抑制DNMT 轉錄起始區的轉錄活性進而抑制DNMT 蛋白的表現，因 此推測HPV 可能藉由E6 蛋白使p53 蛋白去活化而無法抑制DNMT 的轉錄，進而促使抑癌 基因p16 的甲基化。但在子宮頸癌的研究發現，HPV 16/18 E7 會與HDAC 交互作用，而使 HDAC 維持DNA 雙股結構之能力失效，使E2F 啟動有關細胞增生之基因轉錄活化，本研 究室又發現DNMT1 及DNMT3b 在子宮頸癌組織中的表現量遠低於肺腫瘤組織，且p16 發 生甲基化的頻率也相對偏低。此結果與肺癌組織 (Wu et al., 2005)以及HPV 轉染之細胞所得 之結果，並不相同。這顯示HPV 16/18 E6 及E7 致癌蛋白在肺癌細胞及子宮頸癌細胞株的 甲基化調控機制以及致癌機轉有所不同。除p53 外，DNMT3b 轉錄起始區的基因多型性亦 影響其基因的轉錄調控，且HPV16 致癌蛋白E6 是否會直接調控DNMT3b 的表現則仍不清 楚，因此本計畫擬構築不同基因型之DNMT3b 轉錄起始區轉染至HPV 16 感染的肺腺癌細 胞TL-1 及TL-2 (此系列細胞株為本實驗室由台灣肺癌患者胸水中建立出之HPV 16 感染之 肺腺癌細胞株)，利用report assay 及Chromatin immunopreciption assay (CHIP)方式分析釐清 HPV E6 致癌蛋白是經由抑制p53 而活化DNMT3b，或是可直接經由與DNMT3b 轉錄起始 區結合而活化DNMT 的表現，並釐清HPV 對不同基因型之DNMT3b 的轉錄活性是否有影 響，此外亦利用MS-PCR 及同步定量反轉錄聚合.連鎖反應(real-time RT-PCR)分別偵測p16 基因的甲基化及其mRNA 表現，以證明HPV 確實經由影響DNMT3b 造成p16 基因甲基化 影響p16 抑癌基因表現而使細胞腫瘤化，此部分實驗亦將利用siRNA 技術將TL-1 及TL-2 細胞的HPV 16 E6 抑制後反向證明。本計劃之執行結果將有助於瞭解HPV16 致癌蛋白E6 對甲基化路徑調控的影響。Project