2026-11-092026-11-09https://scholars.csmu.edu.tw/handle/123456789/37940Human parvovirus B19(B19)與自體免疫疾病之發生有密切關係, 過去我們也發現 B19 感染導致自體抗體anti-neutrophil cytoplasmic antibody(ANCA) 及 anti-cardiolipine antibody(aCL),及與SLE 之關係,最近我們也發現B19 之NS1 gene transfecction 到細胞可導致apoptosis,是經由mitochondria pathway,這些研究更 加強B19 在自體免疫疾病之角色。 Momoeda 在1994 年發表之B19 之非結構性蛋白NS1 在334 作單一突變,從lysine 變glutamate,會導致NS1 對細胞之毒性消失,這研究再度顯示NS1 在調節細胞功能之 重要性。 過去自體免疫疾病研究知道各種自體抗原在細胞機能上佔重要的角色,而這些自體 抗原之蛋白質或酵素其function site 往往就是抗原之epitope 之處,如果Momoeda 所 發現之單一突變會改變NS1 之毒性作用,那氨基酸334 之突變可能改變NS1 之抗原性及 可能對apoptosis 之影響減少或消失。 本計劃將NS1 在334 及其他點作單一突變後,轉殖(transfection)到COS-7 細胞或 其他細胞,並研究此突變對transfected 細胞、apoptosis 之變化及antigenicity 之改 變。 NS1 在氨基酸334 作單一突變後,將建構在pET-32a vector,之後在E coli.系統 BL21(DE3),得到大量之重組蛋白(recombinant protein),這些單一突變後之新蛋白質 將與過去我們已大量取得之wild type 之NS1 重組蛋白,以B19 感染之血清,紅班性狼 瘡(SLE)或類風濕性關節炎(RA)之血清來分析單一突變前及後抗原性變化。 另NS1 在apoptosis 佔重要角色,單一突變後我們將再從transfected 之COS7 細 胞分析其apoptosis 之情況,這些研究將有助於瞭解NS1 的epitope 及對細胞凋亡之角 色。人類微小病毒B19非結構蛋白之單一點突變對其抗原性及細胞凋亡之研究Project