以異源性表達方式探討補骨脂成份衍生物與KCNQ阻斷藥物對於 KCNQ4基因與多型性功能的作用之研究

此計畫主要是探討KCNQ4 作用藥物對於KCNQ4 多型性蛋白功能上作用
的差異。近年來的一些研究調查得知藥物的代謝與副作用受到特定基因其多型
性的影響而產生藥效與副作用的個人化差異，而較少探討作用藥物與受體多型
性之間的關係。我們已知的KCNQ4 作用藥物linopirdine, bepridil 和
5-(4-phenoxybutoxy)psoralen (見計畫內容附件fig.1)等其藥效對於基因多型性是
否有其作用的差異是值得探討的。由於我們已經建立了人類基因KCNQ4 異源性
表達於爪蟾卵母細胞中並可用來做功能測試之系統(見計畫內容參考文獻1，
2)，因此將對於KCNQ4 已知的多型性做一功能性之篩選觀察是否臨床用藥對於
某些多型性之基因對於的影響有所差異性，依據氨基酸序列與蛋白摺疊觀念其
多型性的序列不同既使是微些的差異就有可能造成其蛋白質功能的變異。此計
畫的實施方法為利用已知在臺灣的KCNQ4 多型性基因(KCNQ4：I308T，
G319S，H455E，D606E，W276S，W191S，G201S，V87G)，將以上這些已知
的多型性(polymorphisms)與野生型(Wild-type)基因以點突變的方式並使用試管
內轉錄法製成RNA (in vitro transcription)，將此RNA 注入卵母細胞中以異源性
表達的方法來表達人類蛋白質的功能。臨床用藥bepridil ， 補骨脂衍生
5-(4-phenoxybutoxy) psoralen 和KCNQ4 選擇性阻斷劑linopiridne 分別給予至表
達有這些多型性基因的細胞上，觀察其濃度-作用曲線，功能或化二分之一之電
位等參數指標與wild type 做比較，KCNQ4 多型性蛋白是否其蛋白的感受性對於
bepridil，補骨脂衍生5-(4-phenoxybutoxy)psoralen 和KCNQ4 選擇性阻斷劑
linopiridne 等藥物的影響有所不同。此計畫之完成可以更加瞭解臨床用藥之藥效
所造成個體之間差異的因素並且有助於在臺灣個人化藥物(personalized medicine)
治療上提供更進一步的資訊。