草蝦幾丁質結合蛋白之功能分析與抗白點症病毒疫苗之開發研究

白點症病毒是造成台灣以及世界其他地區養殖蝦類嚴重死亡的病原體。利用蛋白質體學技術分析白點症病毒的結構，發現VP53A為白點症病毒膜蛋白之一種。為明瞭VP53A與寄主細胞的交互作用，我們利用酵母菌雙雜合系統從草蝦中篩選到草蝦幾丁質結合蛋白，此蛋白質有一預測的穿膜區域，在草蝦各組織中皆會表現。此外，利用大腸桿菌所生產的重組VP53A進行小量的草蝦的免疫實驗，初步的實驗結果發現病毒量有明顯下降趨勢，死亡率亦明顯降低。由於VP53A為白點症病毒膜蛋白，而草蝦幾丁質結合蛋白可能位於草蝦細胞之細胞膜上，因此我們推測草蝦幾丁質結合蛋白與病毒膜蛋白VP53A的結合可能與病毒入侵寄主細胞有關。因此，本計畫擬分為三年進行：第一年主要方向在釐清草蝦幾丁質結合蛋白與病毒膜蛋白VP53A在生物體中實際的作用模式，以釐清是否與病毒入侵寄主細胞有關，並進行免疫實驗擴大蝦體數量；第二年主要方向在利用結構生物學來解開PmCBP和VP53蛋白質結構，分析他們特有的活性功能區域，並分析免疫實驗運用在種蝦免疫方面的效力；第三年主要方向在利用結構生物學、生物資訊學和系統生物學等知識設計出藥物或發展更好的DNA或蛋白質疫苗。我們期待能解開WSSV致病分子機制，並開發出最有效的疫苗應用於產業界。